INGENIERÍA GENÉTICA - SECUENCIACIÓN

Biomedal pone a su disposición diversos servicios de secuenciación de ADN, ofreciendo reacciones de la mejor calidad hasta 700 pb, con rápido tiempo de respuesta y precios altamente competitivos para sus necesidades de secuenciación.

Tanto si necesita una secuenciación sencilla (PCR/plásmidos) como una más compleja, como para cósmidos, fagos y BACs; Biomedal pone a su disposición un servicio completo y eficiente.

Además, ofrecemos alineaciones y comparación de secuencia de electroforesis capilar, así como un servicio de Primer-walking, disponible para secuencias de hasta 15 kb.

 

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Condiciones generales del servicio:

Envío de muestras:

- ADN y primers deben ser enviados en tubos separados.

- En solución o deshidratados, libres de EDTA.

- No es necesario refrigeración. (NOTA: En caso de enviarlo con refrigeración no usar hielo).

- Aislar los tubos con parafilm y envolverlos en material acolchado.

- Escribir MATERIAL FRÁGIL en el sobre.

Especificaciones y condiciones para secuenciación de ADN:

Características del servicio:

- Para plásmidos, productos de PCR, cósmidos, fagos y BACs.

- Lectura de hasta 700 pb, dependiendo de la calidad y del ADN molde.

- Diseño y síntesis de primers específicos.

- Alineación y comparación de secuencias (opcional).

- Almacenamiento del DNA molde y de los primers durante un mes.

- Análisis de calidad de cada secuencia (exactitud > 99%).

- Oferta de primers universales.

Su muestra:

Para obtener los mejores resultados, envíenos su muestra de ADN altamente purificada. Muestras y primers deberán ser entregadas en tubos separados.

A continuación se indican las cantidades mínimas de ADN necesarias para la secuenciación:

- Plásmidos: 100-200 ng/µl en ddH2O, 1 µg/reacción.

- Productos de PCR: 30-60 ng/µl en ddH2O, 1 µg/reacción.

- Cósmidos y fagos: mínimo de 400 ng/µl, 3,0 µg mímino reacción.

- Primers: mínimo de 10 pmol/µl en ddH2O en un total de 50 pmol mínimo/reacción.

Volumen mínimo recomendado para enviar las muestras de ADN: 15 µl de ddH2O.

PRIMERS FORWARD	SECUENCIA
T7 FwdpGEM	5'-GTA ATA CGA CTC ACT ATA GGG C-3'
T7 Fwd	5'-TAA TAC GAC TCA CTA TAG G-3'
M13 Fwd	5'-TGT AAA ACG ACG GCC AGT-3'
pT7-ET	5'-ATG CGT CCG GCG TAG A-3'
nT7fwd	5'-AAY ACG ACT CAC TAT AG-3'
PQE30fwd	5'-CCC GAA AAG TGC CAC CTG-3'
5pGEX	5'-GGG CTG GCA AGC CAC GTT TGG TG-3'

PRIMERS REVERSE	SECUENCIA
T7 Rev	5'-GCT AGT TAT TGC TCA GCG G-3'
T3	5'-ATT AAC CCT CAC TAA AGG G-3'
M13 Rev	5'-CAG GAA ACA GCT ATG ACC-3'
SP6	5'-ATT TAG GTG ACA CTA TAG-3'
BGHrev	5'-TAG AAG GCA CAG TCG AGG-3'
PQE30rev	5'-GTT CTG AGG TCA TTA CTG G-3'
U19mer	5'-TTT TCC CAG TCA CGA CGT-3'
3pGEX	5'-CCG GGA GCT GCA TGT GTC AGA GG-3'

Especificaciones y condiciones del servicio de electroforesis capilar:

Si ya tiene su muestra de ADN amplificada y tan sólo pretende hacer la lectura de las bases, tenemos a su disposición el servicio de lectura por electroforesis capilar.

Nota: Este servicio sólo es válido para las muestras secuenciadas con el Kit BigDyeTerminator v1.1 y v3.1 de Applied Biosystems.

Características del servicio:

- Lectura hasta 700 bases.

- Electroforesis de reacciones hechas por el cliente.

Su muestra:

TEl material amplificado y purificado debe ser entregado en pellet seco.

Especificaciones y condiciones del servicio de Primer-Walking:

En el caso que tenga secuencias largas que no puedan ser leídas en una lectura sencilla, Biomedal tiene disponible el servicio de Primer-Walking, para lecturas en un sentido o en ambos sentidos.

Características del servicio:

- Lectura hasta 15 kb.

- Diseño y síntesis de primers específico.

- Alineación y corrección de las secuencias.

- Almacenamiento de ADN molde y de los primers por un periodo de un mes.

Ref.	Producto
SE-3384	Secuenciación Plásmidos 1-2 muestras
SE-3385	Secuenciación Plásmidos 3-8 muestras
SE-3386	Secuenciación Plásmidos 9-49 muestras
SE-3387	Secuenciación Plásmidos = o >50 muestras
SE-3388	Secuenciación PCR 1-2 muestras
SE-3389	Secuenciación PCR 3-8 muestras
SE-3390	Secuenciación PCR 9-49 muestras
SE-3391	Secuenciación PCR = 0 >50 muestras
SE-6667	Secuenciación Cósmidos/Fagos/BACs