ANTICUERPOS - Producción

Anticuerpos Policlonales:

El Servicio de Producción de Anticuerpos Policlonales de Biomedal ofrece la posibilidad de producir anticuerpos en conejos a partir de sus proteínas, péptidos, pequeñas moléculas, plásmidos, etc. Además, en combinación con nuestros Servicios de Producción de Péptidos, podemos sintetizar cualquier péptido antigénico necesario para generar el anticuerpo de interés.

Producción de anticuerpos policlonales a partir de una muestra dada en conejo:

Este servicio produce la cantidad de anticuerpo policlonal deseada por el cliente a partir de una muestra antigénica proporcionada por él mismo.

Detalles del servicio:

- Análisis de la muestra proporcionada para seleccionar las regiones de mayor antigenicidad.

- Purificación de la muestra por HPLC.

- Conjugación de la muestra con el carrier KLH, BSA o Blue Carrier, a través de un residuo N- o C- terminal de la muestra.

- Inmunización de dos conejos.

- Dos extracciones de suero por conejo durante el periodo de inmunización.

- El cliente recibe entre 50 y 100 ml de suero por conejo.

- Se hace una purificación por afinidad de 2 ml de suero de cada conejo.

Protocolo de Inmunización

El protocolo de inmunización podrá ser modificada si el cliente lo estima oportuno.

DÍA	0	14	28	42	56	70	90
Inmunización	1º	2º		3º			4º
Sangrado	*Pre-inmune		*2-5 ml		2-5 ml		Final

(*) Opcionall

La purificación incluye:

- Purificación por proteína G de 2 ml de suero.

- Concentración o diálisis al tampón deseado (ej., 0,15 M PBS).

- Esterilización mediante filtración del producto final, con conservantes y estabilizantes si se requieren.

El cliente recibe:

- Entre 50 y 100 ml de suero de cada conejo.

- Suero de cada una de las 2 extracciones realizadas durante la rutina de inmunización.

- Anticuerpo purificado por proteína G de 2 ml de la extracción final de cada conejo (1-5mg).

Este servicio incluye: análisis del péptido para la selección de regiones de mayor antigenicidad. Purificación de la muestra por HPLC. Conjugación de la muestra con el carrier KLH, BSA o Blue Carrier, a través de un residuo N- o C-terminal de la muestra. Inmnización de dos conejos. Dos extracciones de suero por conejo durante el periodo de inmunización. Envío al cliente de 50 a 100 ml de suero por conejo. Purificación por afinidad de 2 ml de suero de cada conejo.

Ref.	Producto
SE-3452	Producción de anticuerpos policlonales a partir de una muestra dada en conejo

Producción de anticuerpos policlonales a partir de síntesis de péptidos en conejo:

En este servicio se incluye el protocolo de síntesis del péptido ya que el de inmunización es exactamente igual.

Detalles del servicio:

- Análisis del péptido para la selección de regiones de mayor antigenicidad.

- Síntesis de péptidos.

- Purificación con HPLC de los péptidos.

- Análisis de pureza por espectometría de masas MALDI.

- S- Conjugación del péptido al carrier KLH, BSA o Blue Carrier, a través de un residuo N- o C- terminal del péptido.

- - Entrega del péptido sintetizado que no se ha conjugado.

- Inmunización de 2 conejos.

- 2 extracciones de suero durante el periodo de inmunización, por cada conejo.

- Entre 50 y 100 ml de suero por conejo.

- Se hace una purificación por afinidad de 2 ml de suero de cada conejo.

Protocolo de inmunización:

El protocolo de inmunización es igual que el anterior servicio. El protocolo de inmunización podrá ser modificado si el cliente lo estima oportuno.

DÍA	0	14	28	42	56	70	90
Inmunización	1º	2º		3º			4º
Sangrado	*Pre-inmune		*2-5 ml		2-5 ml		Final

(*) Opcional

La purificación incluye:

- Purificación por Proteína G de 2 ml de suero..

- Concentración o diálisis al tampón deseado (ej., 0,15 M PBS).

- Filtración estéril del producto final, con conservantes y estabilizantes si se requieren.

El cliente recibe:

- Entre 50 y 100 ml de suero de conejo.

- Suero de cada una de las 2 extracciones realizadas durante la rutina de inmunización.

- Anticuerpo purificado por proteína G de 2 ml de la extracción final de cada conejo (1-5mg).

Este servicio incluye: Análisis del péptido para la selección de regiones de mayor antigenicidad. Síntesis del péptido. Purificación por HPLC de los péptidos. Análisis de pureza por espectrofotometría de masas MALDI. Conjugación de la muestra con el carrier KLH, BSA o Blue Carrier, a través de un residuo N- o C-terminal del péptido. Entrega del péptido sintetizado que no se ha conjugado. Inmunización de dos conejos. Dos extracciones de suero por conejo durante el periodo de inmunización. Envío al cliente de 50 a 100 ml de suero por conejo. Purificación por afinidad de 2 ml de suero de cada conejo.

Ref.	Producto
SE-3453	Producción de anticuerpos policlonales a partir de síntesis de péptidos en conejo

Otros servicios

Ref.	Producto
SE-4897	Servicio Express de Producción de anticuerpos policlonales a partir de una muestra dada en conejo
SE-4822	Producción de anticuerpos policlonales a partir de una muestra dada en cobaya
SE-4826	Producción de anticuerpos policlonales a partir de síntesis de péptidos en cobaya
SE-4823	Producción de anticuerpos policlonales a partir de una muestra dada en cabra
SE-4827	Producción de anticuerpos policlonales a partir de síntesis de péptidos en cabra
SE-4824	Producción de anticuerpos policlonales a partir de una muestra dada en rata
SE-4828	Producción de anticuerpos policlonales a partir de síntesis de péptidos en rata
SE-4825	Producción de anticuerpos policlonales a partir de una muestra dada en pollo
SE-4829	Producción de anticuerpos policlonales a partir de síntesis de péptidos en pollo
SE-5014	Producción de anticuerpos policlonales a partir de una muestra dada en gallina
SE-5136	Producción de anticuerpos policlonales a partir de síntesis de péptidos en gallina

Anticuerpos Monoclonales:

El servicio de Producción de Anticuerpos Monoclonales estándar de Biomedal se basa en la línea de ratón Balb-c. El servicio incluye las siguientes fases:

2. INMUNIZACIÓN, FUSIÓN CELULAR, SELECCIÓN Y SCREENING: Immunización de al menos 2 ratones (Balb-C), cultivo de células de mieloma de la línea SP2, fusión celular, selección y screening.

3. CLONACIÓN: Clonación, screening y cultivo de los hibridomas positivos. El cliente recibirá el sobrenadante de cultivo necesario por cada clon positivo para testarlo por medio de su propio sistema.

4. CRIOPRESERVACIÓN: Se criopreservarán tres viales por cada clon estable positivo. Los crioviales y 10 ml del sobrenadante del cultivo de cada clon positivo serán enviados al cliente. Además se podrán almacenar otros dos crioviales en nuestras instalaciones hasta que el cliente lo estime oportuno (con un mínimo coste adicional).

5. CARACTERIZACIÓN DE LOS CLONES SELECCIONADOS: Se determinará el isotipo Ig y se realizará un test de deteción de Micoplasma. Se emitirá el certificado correspondiente.

6. EL CLIENTE PAGARÁ SOLO EN CASO DE ÉXITO: A partir de la 3ª fase se conocerá si se han conseguido clones positivos contra el inmunógeno. El cliente solo pagará si se supera la 3ª fase satisfactoriamente. En este caso el cliente deberá pagar el 50% del coste total del servicio. La segunda parte del pago se realizará a la entrega del producto.

7. DERECHOS DEL CLIENTE: El cliente adquiere la posesión de todos los clones positivos y recibirá una completa documentación de todo el trabajo realizado para la producción del anticuerpo monoclonal.

8. OTROS SERVICIOS: Ofrecemos el servicio de producción del anticuerpo alegido a gran escala, purificación del mismo y conjugación con diversos fluorocromos y enzimas.

Protocolo de Producción de Anticuerpos Monoclonales:

FASE I: Inmunización

El periodo de inmunización puede variar entre 30 y 90 días según necesidades. La proteína será entregada por el cliente. Si es necesaria la síntesis del péptido por nuestra parte, se aplicará un coste adicional.

FASE II: Fusión, screening y selección

En esta fase se incluye la generación de un cultivo primario, la selección en medio HAT y el screening. La fusión de las células del bazo con células de mieloma de la línea celular Sp2/0, se realizará por medio de nuestro esquema estándar. Todos los cultivos primarios donde exista crecimiento y producción de Ig serán testados por el cliente.

FASE III: Clonación y screening

Todos los clones positivos serán utilizados para futuras subclonaciones. La clonación se llevará a cabo por el método de dilución límite. Después de cada clonación se hará un screening de los positivos. El cliente recibe 1 ml de sobrenadante de cada clon con crecimiento para su testado.

FASE IV: Segunda clonación, screening, estabilización y criopreservación

En esta fase se llevan a cabo los pasos necesarios para obtener los clones puros, incluído el testado por el cliente. Al final obtendremos tres crioviales y 10 ml de cultivo por cada clon positivo. Biomedal almacenará dos crioviales de cada clon durante algunos meses que solo serán utilizados bajo autorización del cliente.

FASE V: Caracterización de los clones seleccionados

Todos los clones seleccionados se enviarán previamente testado para:

- Determinación de la subclase Ig.

- Test de Micoplasma.

Se emitirá un certificado de resultados.

Condiciones y Garantías

Biomedal garantiza un mínimo de 3 clones positivos productores de Ig contra el inmunógeno utilizado. El cliente será el que teste los clones.

The clone will be tested by the customer.

FASE VI: (opcional)

Purificación:

El tipo de purificación varía según los requerimientos y necesidades del cliente:

- Precipitación con sulfato de amonio.

- Purificación con Proteína A o G.

- Purificación por afinidad con antígenos.

- Purificación por gel de filtración.

Conjugación:

El anticuerpo producido se podrá conjugar con fluorocromos o enzimas.

Ref.	Producto
SE-3446	Servicio de conjugación de anticuerpo con Biotina
SE-3447	Servicio de conjugación de anticuerpo con R-PE
SE-3448	Servicio de conjugación de anticuerpo con APC
SE-3449	Servicio de conjugación de anticuerpo con HRP
SE-3451	Producción usando hibridomas
SE-3454	Hybridoma Cryopreservation